WML2 小鼠肺成纖維細(xì)胞
WML2 小鼠肺成纖維細(xì)胞源于小鼠肺部組織,作為成纖維細(xì)胞系的一員,在肺部生理病理機(jī)制研究、藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域具有重要價(jià)值。該細(xì)胞保留了肺成纖維細(xì)胞的典型生物學(xué)特征,為探索肺部疾病發(fā)**展提供了可靠的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?/span>
從細(xì)胞特性來(lái)看,WML2 小鼠肺成纖維細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng),形態(tài)上多表現(xiàn)為長(zhǎng)梭形或不規(guī)則星形,細(xì)胞間常以輻射狀或漩渦狀有序排列。在顯微鏡下觀察,細(xì)胞輪廓清晰,細(xì)胞核大且居于細(xì)胞中央,呈卵圓形,核仁明顯,細(xì)胞質(zhì)豐富并延伸出細(xì)長(zhǎng)的突起,這種形態(tài)結(jié)構(gòu)與其在肺組織中構(gòu)建細(xì)胞外基質(zhì)、維持組織穩(wěn)態(tài)的功能緊密相關(guān)。通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)等方法檢測(cè),可發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞高表達(dá)成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物波形蛋白(Vimentin),而不表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)志物,從而明確其細(xì)胞屬性。
在培養(yǎng)條件方面,WML2 細(xì)胞適宜生長(zhǎng)在含 10% - 15% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基中,同時(shí)添加 1% 的雙抗(青霉素和鏈霉素)以預(yù)防細(xì)菌污染。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),以保證細(xì)胞活性。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),需使用胰酶 - EDTA 消化液進(jìn)行傳代,傳代比例通??刂圃?1:3 - 1:5 ,以維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)狀態(tài)。凍存時(shí),采用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液,經(jīng)程序降溫后保存于液氮中,便于長(zhǎng)期保存和后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
WML2 小鼠肺成纖維細(xì)胞在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。在肺纖維化研究中,通過(guò)添加博來(lái)霉素、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 - β(TGF-β)等刺激物,可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生纖維化表型轉(zhuǎn)變,進(jìn)而深入探究肺纖維化的分子機(jī)制和信號(hào)通路;在藥物研發(fā)方面,可用于評(píng)估藥物對(duì)肺成纖維細(xì)胞增殖、遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)分泌的影響,篩選具有抗纖維化或促進(jìn)肺組織修復(fù)作用的潛在藥物;此外,在肺部炎癥反應(yīng)研究中,該細(xì)胞還可作為模型,分析炎癥因子對(duì)肺成纖維細(xì)胞功能的調(diào)控作用,為闡明肺部炎癥性疾病的病理過(guò)程提供依據(jù)。
WML2 細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)在于細(xì)胞來(lái)源清晰,能較好模擬體內(nèi)肺成纖維細(xì)胞的生理功能,且培養(yǎng)和操作相對(duì)簡(jiǎn)便,適合開(kāi)展大規(guī)模實(shí)驗(yàn)。但它也存在局限性,作為小鼠來(lái)源的細(xì)胞系,與人肺成纖維細(xì)胞存在種屬差異,實(shí)驗(yàn)結(jié)果在向臨床轉(zhuǎn)化時(shí)需謹(jǐn)慎驗(yàn)證;同時(shí),隨著體外傳代次數(shù)增加,細(xì)胞可能出現(xiàn)老化現(xiàn)象,導(dǎo)致生物學(xué)特性發(fā)生改變,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
使用 WML2 小鼠肺成纖維細(xì)胞時(shí),需定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè),包括標(biāo)志物表達(dá)、細(xì)胞活性等指標(biāo);嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,防止細(xì)胞污染;合理控制傳代次數(shù),避免因過(guò)度傳代導(dǎo)致細(xì)胞功能異常。憑借其獨(dú)特的生物學(xué)特性,WML2 細(xì)胞將持續(xù)助力肺部疾病相關(guān)研究的深入開(kāi)展。