CHGF-003 是從大鼠乳腺癌組織中分離建立的永生化細(xì)胞系，屬于上皮樣細(xì)胞形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)。該細(xì)胞系具有典型的乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)特征，如增殖能力強(qiáng)、可形成克隆集落，且保留了部分原發(fā)腫瘤的分子標(biāo)志物（如雌激素受體 ER、孕激素受體 PR 等），但具體表達(dá)水平需通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。其染色體核型分析顯示為異倍體，說(shuō)明基因組穩(wěn)定性較差，這與乳腺癌細(xì)胞的遺傳多樣性和惡性特征一致。作為大鼠來(lái)源的細(xì)胞模型，CHGF-003 在種屬特異性研究中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，可避免人源細(xì)胞與大鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型之間的種屬差異問(wèn)題，尤其適用于乳腺癌基礎(chǔ)研究和藥物篩選的臨床前實(shí)驗(yàn)。
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培養(yǎng)基與環(huán)境
CHGF-003 通常使用含 10% 胎牛血清（FBS）的 DMEM 或 RPMI 1640 培養(yǎng)基，添加 1% 雙抗（青霉素 + 鏈霉素），置于 37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。需注意不同實(shí)驗(yàn)室可能優(yōu)化過(guò)培養(yǎng)條件，建議**培養(yǎng)時(shí)參照細(xì)胞來(lái)源方提供的說(shuō)明書(shū)。
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傳代與凍存
當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80%~90% 時(shí)需傳代，采用胰酶 - EDTA 消化法（0.25% 胰酶消化 1~2 分鐘），傳代比例建議 1:2~1:3，避免密度過(guò)低影響細(xì)胞狀態(tài)。凍存時(shí)使用含 10% DMSO、20% FBS 的培養(yǎng)基，按每管 1×10?~5×10?細(xì)胞密度分裝，程序降溫后轉(zhuǎn)入液氮保存。
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質(zhì)量控制
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污染檢測(cè)：定期通過(guò)鏡檢觀(guān)察培養(yǎng)基是否渾濁、細(xì)胞形態(tài)是否異常，結(jié)合支原體檢測(cè)試劑盒確保無(wú)微生物污染。
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活力評(píng)估：臺(tái)盼藍(lán)染色法檢測(cè)細(xì)胞存活率，正常傳代細(xì)胞活力應(yīng)＞90%，復(fù)蘇后活力需＞85%。
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特性驗(yàn)證：通過(guò) Western blot 或免疫熒光檢測(cè)乳腺癌相關(guān)標(biāo)志物（如 HER2、Ki-67），確認(rèn)細(xì)胞屬性。
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乳腺癌發(fā)生機(jī)制研究
CHGF-003 可用于探究激素調(diào)控、基因突變（如 BRCA1/2）或表觀(guān)遺傳改變?cè)谌橄侔﹩?dòng)與進(jìn)展中的作用。例如，通過(guò)敲除 ER 基因觀(guān)察細(xì)胞增殖能力變化，或使用 DNA 甲基化抑制劑分析基因表達(dá)譜差異，揭示表觀(guān)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。
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藥物篩選與藥效評(píng)價(jià)
該細(xì)胞系對(duì)化療藥物（如紫杉醇、阿霉素）和靶向藥物（如 HER2 抑制劑）敏感，可用于體外藥物毒性測(cè)試和療效篩選。結(jié)合大鼠原位移植模型，還可進(jìn)一步驗(yàn)證藥物在體內(nèi)的抗腫瘤效果及轉(zhuǎn)移抑制能力，為臨床前研究提供轉(zhuǎn)化數(shù)據(jù)。
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腫瘤微環(huán)境研究
CHGF-003 與成纖維細(xì)胞、免疫細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，可模擬腫瘤微環(huán)境中的細(xì)胞間相互作用，分析基質(zhì)細(xì)胞對(duì)乳腺癌細(xì)胞侵襲、遷移的影響，或探討免疫逃逸機(jī)制。
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基因編輯與靶向治療
利用 CRISPR-Cas9 等工具對(duì) CHGF-003 進(jìn)行基因編輯，可構(gòu)建攜帶特定突變的細(xì)胞株（如 P53 缺失），用于研究靶向治療的敏感性或耐藥機(jī)制。
CHGF-003 作為永生化細(xì)胞系，與原發(fā)腫瘤的異質(zhì)性可能存在差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果需結(jié)合臨床樣本驗(yàn)證。此外，大鼠與人類(lèi)乳腺癌的分子特征不完全一致，在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中需謹(jǐn)慎外推結(jié)論。培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)避免過(guò)度傳代（通常建議傳代≤20 代），以防細(xì)胞特性發(fā)生漂移。
總之，CHGF-003 為乳腺癌研究提供了便捷的大鼠模型工具，其應(yīng)用需結(jié)合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)合理選擇，并通過(guò)多維度驗(yàn)證確保數(shù)據(jù)可靠性。