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PA317小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
貨號(hào)：BY-0756
品牌：其它品牌
規(guī)格：T25瓶
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PA317 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
PA317 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞是生命科學(xué)研究中的重要工具細(xì)胞，由原代小鼠胚胎成纖維細(xì)胞經(jīng)改造獲得，在基因轉(zhuǎn)導(dǎo)與載體生產(chǎn)領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
這類細(xì)胞呈現(xiàn)典型成纖維細(xì)胞形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)時(shí)呈梭形或不規(guī)則三角形，細(xì)胞間常以放射狀或漩渦狀排列。其遺傳背景源于小鼠，經(jīng)基因工程改造后，PA317 細(xì)胞能夠高效包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，這一特性使其成為生產(chǎn)重組逆轉(zhuǎn)錄病毒的理想宿主。在培養(yǎng)過(guò)程中，PA317 細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不苛刻，常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基，在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中即可良好生長(zhǎng)。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80% - 90% 融合時(shí)，需使用胰酶 - EDTA 消化液進(jìn)行傳代，傳代比例一般為 1:3 - 1:5，凍存時(shí)采用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液，經(jīng)程序降溫后保存于液氮中。
PA317 細(xì)胞*突出的應(yīng)用在于病毒載體生產(chǎn)。科研人員可將攜帶目的基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至 PA317 細(xì)胞，利用其細(xì)胞內(nèi)的包裝元件，生產(chǎn)具有感染能力的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒。這些病毒顆?？捎糜趯⑼庠椿?qū)腚y以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型，如原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等，在基因功能研究、基因治療探索中具有重要意義。此外，PA317 細(xì)胞還可作為基因編輯工具的輔助細(xì)胞，通過(guò)包裝攜帶 CRISPR - Cas9 系統(tǒng)的逆轉(zhuǎn)錄病毒，實(shí)現(xiàn)特定基因的敲除、敲入或調(diào)控，助力疾病相關(guān)基因的功能驗(yàn)證。
PA317 細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)顯著，其具有高效的病毒包裝能力，生產(chǎn)的逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度高，能有效感染多種類型細(xì)胞；且細(xì)胞易于培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染，操作難度較低，適合大規(guī)模實(shí)驗(yàn)需求。然而，該細(xì)胞也存在局限性，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體整合到宿主基因組具有隨機(jī)性，可能引發(fā)插入突變風(fēng)險(xiǎn)；同時(shí)，PA317 細(xì)胞為小鼠來(lái)源，在應(yīng)用于人體相關(guān)研究時(shí)，需謹(jǐn)慎評(píng)估種屬差異帶來(lái)的影響。
使用 PA317 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞時(shí)，需嚴(yán)格控制細(xì)胞傳代次數(shù)，避免因過(guò)度傳代導(dǎo)致病毒包裝能力下降；同時(shí)，要做好生物**防護(hù)，因其生產(chǎn)的病毒具有感染性。憑借高效的病毒包裝特性，PA317 細(xì)胞持續(xù)推動(dòng)著基因工程與細(xì)胞治療研究的發(fā)展。
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