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人可溶性腫瘤壞死因子-1(sTNF-1)試劑盒

人可溶性腫瘤壞死因子-1(sTNF-1)試劑盒試劑盒(ELISA)種屬多樣完備

簡述利用試劑盒法測定毒鼠強(qiáng)的原理并簡述此方法檢測固體樣品的過程? ● 試劑盒法檢測原理:毒鼠強(qiáng)可與二羥基萘二磺酸發(fā)生反應(yīng)變?yōu)榈仙?,本方法檢出限為1ug,低檢出濃度為2ug/ml,濃度高時可變?yōu)樯罴t色。 ● 檢測固體樣品過程:取2mL或2g樣品放入比色管中,加入5mL乙酸乙酯,充分振搖,靜置,取上清液2mL于試管中或表面皿上,在 85℃左右水浴中加熱,待乙酸乙酯剩余1mL以下時,提高水浴溫度揮干余液,放至室溫后,加入1mL的純凈水充分溶解殘渣,加入3滴毒鼠強(qiáng)顯色劑,輕輕搖勻,加入 5mL毒鼠強(qiáng)試液,輕輕搖動后,將試管放入90℃以上水浴中,加熱5min后取出,觀察顏色變化。溶液顏色變?yōu)榈霞t色為毒鼠強(qiáng)陽性反應(yīng),隨著毒鼠強(qiáng)濃度增加,紫色加深。

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檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營種類:進(jìn)口分裝和原裝、國產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標(biāo)本:血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。


人可溶性腫瘤壞死因子-1(sTNF-1)試劑盒

● 試劑盒操作步驟如下: ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知,因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜,用鉛筆標(biāo)上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉(zhuǎn)印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說,一抗要檢測一到兩個稀釋度,而二抗要檢測兩到三個稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點(diǎn)在膜上。每個點(diǎn)的體積越少越好(1-5μl),以保證點(diǎn)盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品,在點(diǎn)完一次后,干燥2-5分鐘,再點(diǎn)一次。讓膜干燥10-15分鐘,或直至無可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點(diǎn),室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗,并加到膜上,室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次,每次5分鐘,用盡可能大體積的洗脫液。 9.準(zhǔn)備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點(diǎn)完全濕潤,且印跡點(diǎn)在孵育過程中不會干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護(hù)膜上。 12.蛋白一側(cè)朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結(jié)果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產(chǎn)生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產(chǎn)品。

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編輯:小檀20181226

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